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DM750雙筒熒光顯微鏡要如何正確使用
發布時間:2020-11-19   點擊次數:390次
   DM750雙筒熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。
  一、使用方法:
  將材料片放在載物臺上。
  開啟DM750雙筒熒光顯微鏡穩壓器,然后按下啟動組點燃紫外燈15min內不得關閉,關閉后3min內不得再啟動。
  將激發濾光片轉至v,分色片調到v,選用495或475nm阻擋濾光片。
  選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。
  在玻片上加無熒光油,先用40x,再用100x調焦鏡檢,呈現熒光。
  因熒光物質受紫外光照射時隨時間的增長熒光逐漸變弱,因此鏡檢時應經常變換視野。
  亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料(用低倍鏡時不加無熒光油)。
  二、記錄熒光圖像:
  DM750雙筒熒光顯微鏡所看到的熒光圖像,一是具有形態學特征,二是具有熒光的顏色和亮度,在判斷結果時,必須將二者結合起來綜合判斷。結果記錄根據主觀指標,即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察,基本上可靠的。隨著技術科學的發展,在不同程度上采用客觀指標記錄判斷結果,如用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果,也必須結合主觀的判斷。
  熒光攝影技術對于記錄熒光圖像十分必要,由于熒光很易褪色減弱,要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24o以上。因紫外光對熒光猝滅作用大,如FITC的標記物,在紫外光下照射30s,熒光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統裝置。
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